一种特异性的DNA病毒基因组定点改造及筛选方法 - 佰腾专利检索

摘要:

本发明提供了一种特异性的DNA病毒基因组定点改造及筛选方法,如下:一、构建定点切割单链、双链核酸酶系统及同源序列;二、导入定点切割单链核酸酶系统和同源序列的细胞感染DNA病毒,待细胞病变,收集P1子代病毒;三、导入定点切割双链核酸酶系统的细胞感染P1子代病毒,待细胞病变,收集P2子代病毒;最后从P2子代病毒中分离纯化获得目的子代病毒。上述二为病毒基因组同源重组步骤,在不引入随机突变的情况下,提高病毒基因组同源重组效率约十万倍;上述三为特异性扩增步骤,进一步提高特异性突变病毒在子代病毒中的比例约十倍左右。本发明能有效控制突变类型,并快速方便地筛选获得具有特定突变、缺失或插入的重组病毒。 - 佰腾专利检索

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